PEPZyme® é uma DNA polimerase do tipo KlenTaq, uma versão da Taq polimerase com deleção da porção N-terminal, responsável pela atividade exonucleásica 5'→3'. Essa característica confere maior tolerância a inibidores presentes em amostras complexas, como sangue, solo e outras matrizes com pureza reduzida, além de fidelidade cerca de 25% superior e termoestabilidade cerca de 2°C superior à Taq selvagem, resultando em maior rendimento de amplicon. Vem desidratada e fracionada diretamente nos poços de uma placa universal de 96 poços, pronta para receber a amostra e o mix de reação. Por não possuir atividade exonucleásica 5'→3', o PEPZyme® não é compatível com o uso de sondas hidrolisáveis (como outras enzimas da mesma categoria), sendo indicado para reações do tipo endpoint ou outros sistemas de detecção compatíveis com esse perfil enzimático.
Características e Indicações
Ativação por hot start
Reduz amplificações inespecíficas e a formação de dímeros de primers.
Reação fora do gelo
Pronta para uso direto no poço, com fluxo de trabalho simplificado.
Produto completo
Inclui tiras de tampas ópticas compatíveis e selecionadas, garantindo a qualidade da leitura em todo o sistema
Resistência térmica
Maior estabilidade e especificidade em comparação à Taq polimerase convencional
Alto desempenho frente a amostras desafiadoras
Alta tolerância a inibidores presentes em amostras de sangue, solo e outras matrizes complexas
Aplicação
Indicada para PCR e qPCR com corantes intercalantes (não compatível com sondas por não possuir domínio exonucleásico)
Como DryZyme® funciona:
A tecnologia DryZyme® desidrata e fraciona a enzima diretamente nos poços de uma placa universal de 96 poços, compatível com a grande maioria dos equipamentos de PCR/qPCR do mercado.
Cada poço já vem pronto para a reação: basta adicionar sua amostra e o mix de reação, e levar direto ao equipamento. Um fluxo de trabalho mais simples e padronizado, com a reação acontecendo inteiramente fora do gelo.
A placa é destacável em tiras, o que permite usar exatamente o número de reações necessário em cada rotina. O restante permanece lacrado e protegido até o próximo uso. Além da placa, o usuário também recebe tiras de tampas ópticas compatíveis e selecionadas para garantir a qualidade da leitura e do sistema como um todo.
O processo de desidratação preserva a atividade da enzima desde a fabricação até o momento do uso, o que se traduz em maior estabilidade e consistência de resultados, lote após lote.
Como cada poço é de uso individual, o fluxo também fica mais seguro entre diferentes operadores de um mesmo laboratório.
A placa contendo a enzima deve ser armazenada em temperatura ambiente, em local seco e protegido da luz.
Como montar sua reação
1. Prepare o mix de reação contendo tampão de atividade, magnésio (se indicado), dNTP, primers/sondas.
2. Corte as tiras da placa que você deseja utilizar. Guarde o restante em um local seco e protegido da luz.
3. Remova o lacre das tiras e transfira o mix de reação para os poços desejados. São eles que contêm a enzima.
4. Adicione as amostras e transfira as reações diretamente para o termociclador - não precisa agitar ou ressuspender.
